01?典型的pESC-HIS質(zhì)粒遺傳圖譜

02 介紹

質(zhì)粒類型：釀酒酵母蛋白表達(dá)載體

表達(dá)水平：高拷貝

誘導(dǎo)方法：半乳糖

啟動子：GAL1和GAL10

克隆方法：多克隆位點(diǎn)，限制性內(nèi)切酶

載體大小：6706bp

5' 測序引物及序列：

GAL1-F:ATTTTCGGTTTGTATTACTTC GAL10-F: GGTGGTAATGCCATGTAATATG

3' 測序引物及序列：

GALI-R:GTTCTTAATACTAACATAACT GAL10-R: GGCAAGGTAGACAAGCCGACAAC

載體標(biāo)簽：C-Flag,C-Myc

載體抗性：氨芐

篩選標(biāo)記：His3

備注：利用半乳糖誘導(dǎo)，可以同時使兩個基因在釀酒酵母中表達(dá)，這個就是雙表達(dá)載體，可以很好的執(zhí)行一個功能基因和一個協(xié)調(diào)輔助蛋白基因的表達(dá)，發(fā)揮兩個蛋白的協(xié)同作用，比如伴侶蛋白，協(xié)調(diào)手性形成蛋白等等。用于真核蛋白表達(dá)，后接提取膜蛋白微粒體等試驗。

pET-28a(+)是什么，怎么看？-實驗操作系列-1